신경 과학(neuroscience)은 분자 및 세포 수준에서 시스템 수준에 이르기까지 중추(CNS) 및 말초 신경계를 연구하는 가장 빠르게 성장하는 연구 분야 중 하나입니다.

RNAscope™ in situ hybridization 분석은 공간 및 형태학적 맥락을 유지하면서 단일 전사체 검출 수준 및 단일 세포 분해능에서 매우 민감하고 특이적 유전자 발현 분석을 가능하게 함으로써 이러한 문제를 해결하게 합니다. 특히, 다중 뉴런 세포 마커의 동시 검출을 위한 다중화 기능은 강력한 유전자 발현 분석 및 신경계 내의 별개의 세포 집단의 시각화를 가능하게 합니다

RNAscope® 는 Target-specific signal 을 증폭시키기 위한 독점 probe design 알고리즘을 사용하여 조직과 세포내에서 target RNA를 시각화 할 수 있는 빠르고 민감성이 높은 분석법을 제공합니다.

Neuroscience 연구에 ACD의 RNAscope® 를 활용한 여러 data를 확인해보실 수 있습니다. 

신경계에서 target mRNA level 및 세포유형 확인
 

뉴런 및 신경교 세포의 표적 발현 패턴을 구별하기 위해 일반적으로 사용되는 세포 유형 마커에는 각각 뉴런, 소교세포 및 성상교세포의 검출을 위한 Rbfox3, Aif1 및 Gfap이 있습니다.
형광으로 검출가능한 RNAscope multiplex을 사용하여 mouse brain hippocampus Fresh frozen section 에서 이러한 3개의 별개의 세포 집단을 동시에 검출할 수 있었습니다.


 

신뢰할 수 있는 항체가 없을 때 신경계에서 mRNA의 검출
  

G-단백질 결합 수용체(GPCR) 은 다양한 외부 신호에 반응하는 세포 표면 수용체입니다.
신호 분자를 GPCR에 결합시키면 G 단백질이 활성화되고, 이는 다시 임의의 수많은 다른 조절자들에게 신호를 전달 합니다. 따라서 GPCR은 감각에서부터 성장, 호르몬 반응까지 신체 기능의 믿을 수 없는 범위를 조절하는데 관련이 있습니다.
하지만, G-단백질 결합 수용체(GPCR)관련 항체는 GPCR이 세포에서 낮은 수준으로 발현되고, 항체가 정제될 때 불안정한 경향이 있기 때문에 적절한 항원으로 사용할 수 없어 분석에 사용하기 어렵습니다.
RNAscope를 이용하여, Mouse brain FFPE Sample에서 GPCR 의 expression을 확인 할 수 있습니다.


 

Long non-coding RNA 의 검출

Long non-coding RNA 는 단백질 코딩 가능성이 없는 200개 이상의 뉴클레오티드 길이를 가진 크고 다양한 종류의 RNA 전사체입니다.
최근 연구에 따르면 lncRNA가 신경 발달과 뇌 기능에 관여하는 것으로 나타났습니다.
기능적 중요성에도 불구하고, lncRNA가 세포 과정을 제어하는 메커니즘은 여전히 파악하기 어렵습니다.

Mouse brain에서 lncRNA를 검출하기 위하여 lncRNA marker인 NEAT1(red) 와 MALAT1(=NEAT2)(green)를 RNAscope를 이용하여 조직 제한 발현 패턴, lncRNA 의 발현을 시각화 하여 brain에서의 lncRNA 기능을 밝힐 수 있습니다.